【论文一分钟】你所不知道的危险关系——“MG感染”与“精子DNA碎片率”
2019-01-08 22:01:00
分类：顶刊鉴析
生殖支原体(mycoplasma genitalium，MG) 是1981年由Tully首次从男性非淋菌性尿道炎(NGU)患者的泌尿道中分离出来的新的支原体。男性感染MG后可导致急慢性非淋球菌性尿道炎、前列腺炎、淋病后尿道炎、获得性反应性关节炎、睾丸附睾炎，甚至与HIV感染有高度相关，而女性MG感染率更高，危害更大。MG感染导致男性不育或精液质量的下降也有报道，但研究结论一直存在争议。
然而MG自发现以来，鉴于其分离培养较为困难，临床上无法使用培养来检查生殖支原体，而抗体免疫的方法存在交叉感染，准确性很低，无实际临床意义。直到2013年世界卫生组织的性传播疾病诊断指南将核酸扩增法（NAAT）列为生殖支原体唯一的诊断方法。同时，WHO强调利用16S rRNA为靶标的RNA检测技术，在灵敏度上比PCR要高，是目前一种灵敏度、特异度均非常高的MG检测技术。作为RNA技术中的一种，实时荧光核酸恒温扩增技术（simultaneous amplification and testing，简称 SAT）是国内独家以16S rRNA为检测靶标的分子检测技术。
为明确MG感染对男性精液质量的影响，郑州大学第一附属医院外科医学部/南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院/青岛大学基础医学院人体机能学实验室虚拟实验室/金湖县人民医院检验科对此进行了深入研究，并在《中华男科学》杂志上发表了《生殖支原体感染对男性不育患者精液质量的影响》一文：文章采用SAT技术作为MG感染的检测方法，探讨生殖支原体(MG) 在男性不育患者中的感染情况及其对精液质量的影响。
研究方法：
收集2015年3月-7月来南京军区南京总医院生殖医学中心门诊的352例不育患者的精液标本。MG感染采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT) 检测，精液分析根据《WHO人类精液检查与处理实验室手册》第5版进行操作，分析精液PH值、精液量、精子总数、精子浓度、精子总活力、前向运动精子百分率(PR) 、不动精子百分率(IM) 、精子DNA碎片化指数(DFI)等。探讨生殖支原体(MG)在男性不育患者中的感染情况及其对精液质量的影响。检测结果的数据统计采用t检验(t-tests)与非参数检验(Wilcoxon test)的方法。
研究结果：
采用SAT技术检测352例男性不育门诊患者的精液样本，分析其MG感染情况，结果检测出12例阳性，MG感染阳性率为3.4%(12/352) 。MG阴性组与MG阳性组患者的平均年龄(30.53±0.27 vs 31.83±1.83) 岁，平均不育时间(2.97±0.13 vs 2.55±0.39) 年，差异无统计学意义(表1) 。
分析178 例患者（166例MG阴性不育患者和12例MG阳性的患者）的精液参数，比较MG阳性与MG阴性不育患者间精液质量。结果发现，MG阴性患者在精液量[(3.84±0.12)ml vs (2.85±0.14)ml，P=0.008 、PR (23.57±0.99)% vs (15.86±1.72)%，P=0.032]均要显著高于MG 阳性患者，DFI[(20.71±1.55)% vs (30.73±2.24)%，P=0.014］则显著低于MG阳性患者。两组患者的精PH值均在正常范围内，而精子浓度、精子总数、精子总活率、IM两组间无统计学差异。见表2。
结论：
研究发现MG可以吸附在精子的头、体、尾各段，直接影响精子活力，当精子上吸附较多MG后则失去运动能力，随后大量精子粘合在一起，但是少量携带MG的精子仍然可以运动，尤其当MG吸附在精子体部和颈部的时候。研究同时发现精子膜表面大量抗精子抗体存在，这种乳胶粒是MG的8倍大，暗示MG引起精子运动能力下降不仅仅是由于直接的机械损伤，更是包含抗原抗体反应在内的更广范的生物学机制的综合作用。
本研究对比两组患者的精液参数与WHO第5版精液分析正常标准参考值，发现两组患者的精液PH值(≥7.2)、精液量(＞1.5ml)、精子浓度(＞15×106/ml)、精子总数(＞39×106 个/1次射精) 均在正常范围内，PR 均低于WHO第5版精液分析正常标准参考值下限，而IM则偏高。精子活力是衡量精液质量和男性生育力的重要指标之一，以上数据可见本研究对象大部分为弱精子症不育患者，弱精子症在不育男性中约占19%，是男性不育的常见病因。
研究还比较了166例MG感染阴性和12例MG感染阳性不育患者间的精液参数，发现MG感染阳性患者精液量(P=0.008)、PR(P=0.032) 均比MG阴性患者要低，而DFI(P=0.014) 则显著高于阴性对照组。精子浓度、精子总数、精子总活率、IM虽然在两组间无统计学差异，但以上指标在MG阴性不育患者均要略好于MG感染阳性不育患者。说明MG感染可影响精液质量，尤其是精子活力。
除此之外，本研究还发现MG感染不育患者比无感染不育患者其DFI(P=0.014) 显著上升，该发现也是国内首次报道，这也可能是MG导致精子活力下降或者男性不育的一个原因。目前评估男性生育力主要是常规精液分析，包括精液量、PH值、精子浓度、活力、形态。但是大约15%的男性不育患者的常规精液分析结果是正常的，准确的诊断就不能简单依靠常规精液分析了，精子DNA损伤就是一个新的衡量指标。据报道成熟精子可表达不同程度的损伤凋亡相关标志。因为精子DFI对受精和妊娠结局有重要影响，所以精子DNA损伤被认为是一个新的评价精液质量和预测生育能力的指标。国外研究发现CT/MG/UU感染可导致精子DNA碎片增多。本研究与此一致。
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