太阳集团(电子游戏)品牌官网-Suncity Club

前沿速递顶刊鉴析指南共识

【论文一分钟】灵敏度之争 —— MP-SAT VS Real-time PCR

2019-01-08 22:01:00 分类:顶刊鉴析

实时荧光恒温扩增技术(SAT)检测病原体RNA,Real-time PCR技术检测病原体DNA;虽都为核酸检测,但检测靶标不同,那么两种方法临床应用的结果有什么不同呢?


浙江大学医学院附属儿童医院检验科在《PLoS One》发表了Evaluation of a real-time method of simultaneous amplification and testing in diagnosis of Mycoplasma pneumonia infection in children with pneumonia一文, 研究了SAT和实时荧光PCR在诊断肺炎支原体感染的应用价值。

THE FRIST

研究方法:收集2016年2月到4月来院治疗的315例儿童,其中男童202例,女童113例。所有入组患儿均已诊断为肺炎支原体感染且未接受过相关治疗。患儿的年龄介于1个月到10岁之间。患者同时采集血清和咽拭子样本,进行SAT、PCR和IgM-ELISA的检测。
135编辑器

THE SECEND

研究结果:


一、MP-SAT灵敏度、特异性分析


(1)为确定MP-SAT法的检测范围,将肺炎支原体标准品M129 (ATCC 29342)连续10倍稀释到10~ 107 CFU /ml。采用MP-SAT和实时荧光PCR进行检测。

结果显示,MP-SAT的检测最低浓度可达到101CFU/ml,而实时荧光PCR为102 CFU/ml;说明MP-SAT灵敏度更高,这可能是由于在相同浓度的肺炎支原体中,rRNA浓度水平(拷贝数)高于DNA。此外,MP-SAT的扩增效率比PCR更高(MP-SAT可在一个循环中产生102-103反应产物)。


(2)为评价MP-SAT的特异性,本研究也对于临床上常见的19种呼吸道病原菌进行了检测,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等7种细菌,腺病毒、呼吸道合胞体病毒、流感病毒等7种病毒,以及、沙眼衣原体、解脲脲原体、唾液支原体等5种支原体和衣原体。


研究结果显示,MP-SAT法能够特异性地鉴别出肺炎支原体,说明MP-SAT技术特异性高。

  


二、比较分析MP-SAT、实时荧光PCR技术和IgM-ELISA检测结果


在研究期间,对每个儿童进行双样本采集后,对样本进行MP-SAT检测和实时荧光PCR检测。共315个样品,其中咽拭子样本197个,痰标本128个。同时采集每个孩子的血液样本进行IgM抗体检测。


结果显示,MP-SAT、Real-time PCR、IgM-ELISA检测的样本阳性率分别为16.51%、15.56%和12.70%。


其中,MP-SAT与IgM-ELISA比较有统计学差异(P=0.04), IgM法检测阳性率低于MP-SAT,可能是因为IgM检测存在窗口期,造成假阴的结果。


 MP-SAT与Real-time PCR比较无统计学意义(P=0.25)。但有3例Real-time PCR阴性的样本,MP-SAT检测的Ct值分别为20.46、23.22、22.16。考虑到MP-SAT有较高的灵敏度,这三例样本可能低于Real-time PCR的检测下限。

135编辑器

THE END

结论:

本研究中,MP-SAT检测的靶标是rRNA,由于RNA能够快速分解,因此它相对于DNA更不稳定。由于MP-SAT的扩增产物也是RNA,因此能有效降低实验室污染导致的假阳性。


本研究的结果显示, MP-SAT比Real-time PCR对肺炎支原体(MP)更敏感,其检测最低浓度为101CFU/ml这种优越的灵敏度可能是由于在相同浓度的肺炎支原体中,rRNA浓度水平(拷贝数)高于DNA。此外,MP-SAT的扩增效率比PCR更高(MP-SAT可在一个循环中产生102-103反应产物)。


MP-SAT在鉴别诊断肺炎支原体方面也有较好的特异性,研究对于19种常见呼吸道感染的病原体同时检测,在其他病原体中无交叉反应。

综上所述,MP-SAT是一种检测方便快速(实验时间2-3小时)、灵敏度高、特异性高的检测肺炎支原体的检测技术,MP-SAT值得成为临床医生的有效诊断工具。

尤其适用于早期发现肺炎支原体的感染,可有效提高患儿肺炎支原体的检出率。


本文部分图片等资料来源于互联网,只供参考之用。太阳集团电子游戏生物不为其版权负责。如果您发现网站上有侵犯您的知识产权的作品,请与管理员取得联系,我们会及时修改或删除。


本文目的仅为传递更多信息及网络分享,太阳集团电子游戏生物不保证信息的真实性、合法性、准确性、有效性、及时性和完整性。本文不代表太阳集团电子游戏生物赞同其观点,也不构成任何其他建议。太阳集团电子游戏生物毋须以任何方式就本文的任何信息或其转载、引用、传播等对订阅者或任何其他人士负任何直接或间接责任。太阳集团电子游戏生物不承担任何人士就使用或未能使用本文信息或任何链接所引致的任何直接、间接、附带、从属、特殊、惩罚性或惩戒性的损害赔偿。


相关推荐

联系方式

电话:021-50720200

邮箱:hr@rdbio.com(国内事务) sales@rdbio.com(国际贸易International Trade)

传真:021-50720186

地址:上海市张江高科技园区东区瑞庆路528号15幢乙号

版权所有 © 太阳集团电子游戏 沪ICP备19003392号 沪公网安备 31011502014243号