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【论文一分钟】解脲脲原体(UU)该怎么检,研究结果给你答案!

2018-12-11 14:36:00 分类:顶刊鉴析

解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)是一种常见的男性非淋球菌性尿道炎致病病原体,与男性不育和胎儿畸形具有相关性。体检人群中UU阳性率可达30%以上,其主要以性传播为主,是我国捐精者必检项目之一。


目前,临床多采用培养法和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitationpolymerase chain reaction,qRT-PCR)检测UU病原体或UU DNA。培养法检测病原微生物几乎是所有病原微生物检测的“金标准”,但培养法对样本转运的条件和时效性要求较高,在临床应用中会出现部分假阴性结果。国内qRT-PCR试剂盒检测的是UU DNA,该方法与培养法比较,敏感性较高。但在临床治疗过程中,DNA相对于RNA的降解时间长,故会延长用药时间或用药剂量。


一直以来,由于RNA极易降解,使其在临床应用中受到限制。实时荧光核酸恒温扩增技术(real-time fluorescence isothermalRNA amplification assay, SAT)的问世实现了临床工作中对病原体RNA的检测,其具有高敏感性,有效解决了RNA在核酸提取过程中易于降解的弊端,现在已经逐步用于临床检测。



郑州大学第三附属医院检验科在《检验医学》杂志撰写了实时荧光核酸恒温扩增技术在解脲脲原体检测中的临床应用价值一文,研究采用培养法、qRT-PCR和SAT分别检测UU、UU DNA和UU RNA,比较其阳性率,为评估UU感染的治疗效果提供了实验室依据。


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研究方法:

对200例捐精体检者采集尿道拭子,分别采用SAT检测UU RNA和实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)检测UU DNA,并采用培养法检测UU病原体;对UU阳性者进行抗菌药物治疗后,再次采用qRT-PCR和SAT进行病原体检测,并对结果进行比较分析。


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研究结果:

一、3种方法检测UU的阳性率比较

培养法、qRT-PCR和SAT检测200例受检者UU的阳性率分别为20.0%、23.0%和22.5%。其中,qRT-PCR的阳性率最高,培养法和SAT检测到的所有阳性样本均包含于qRT-PCR阳性样本中。见表1。


二、用药后qRT-PCR与SAT检测UU阳性率的比较

比较分析用药后采用qRT-PCR和SAT检测UU的检测结果。所有UU DNA阳性捐精者(46例)均进行药物治疗,治疗后15 d进行qRT-PCR和SAT检测。qRT-PCR和SAT检测UU的阳性率分别为39.1%和32.6%。见表2。


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总结:

在临床实际工作中,尽管培养法是目前多数微生物检测的金标准,但其培养周期长、阳性率低,已经成为制约临床诊断的瓶颈之一。近年来,病原体核酸检测逐渐成为病原体感染的主要检测方法之一。目前UU的检测除培养法和qRT-PCR检测UU DNA外,还可采用SAT检测UU RNA作为判断是否感染的手段之一。


本研究对同一份样本采用培养法、qRTPCR和SAT进行UU检测。UU DNA的半衰期比较长,在患者有效用药UU被杀灭后的一段时间内,体内可能还存在残留的UU DNA,会影响医生在用药后的判断和增加用药风险。而UU RNA的有无则直接反映了UU的存活状态,UU RNA阴性,说明UU已经被药物杀死。


本研究还对UU DNA筛查阳性的患者在给与抗菌药物治疗后再次进行UU检测, SAT阳性率低于qRT-PCR。已知UU RNA的阳性率实际上代表了UU活菌的携带状况,而UU DNA检测针对的是UU基因组DNA,不能及时反映病原体的生长状态。当病原体在药物或其他因素诱导下死亡后,RNA由于极其容易被RNase降解而迅速消失,但病毒基因组DNA却仍可在一段时间内存在。因此,医生在判断药物治疗是否有效中SAT检测更为适用。


因此,若以DNA检测为基准,则会延长药物的使用时间或提高药物的使用剂量;若以RNA检测为基准,则更能准确判断药物治疗的效果,不仅可以节省大量的治疗费用,同时可避免过量使用抗菌药物。

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